液相色谱样品和对照品出峰时间相差在多少范围内合适?
时间窗口一般设定5%,一般单组分条件不变最多2%以内,多组分就应该在1%以内才定性准确。
如何把液相色谱两个峰分开?
只需要用鹏化玻璃就可以把液相色谱的两个峰分开。
液相色谱一定是将水相与有机相混合后、抽滤(使用混合型过滤膜),用一个管路(如A管)泵入仪器,这是使用的原则。切勿因节约有机相、便于摸索色谱条件等原因而使用两个管路(一个纯水相、一个纯有机相)泵入仪器,即便配制了脱气机。因此种情形极易造成水相中盐和表面活性剂的少量析出。
高效液相色谱浓度和峰面积成反比?
峰高指待测组分从柱后洗脱出最大浓度时检测器输出的信号值,单位一般为mAU,AU或mV,也可代表相对含量,但不如峰面积准确 峰面积指峰高与保留时间的积分值,单位一般相应为mAU*min,AU*min或mV*min,代表相对含量比较准确 峰面积比代表各物质的相对百分含量,单位一般为% 不知回答得满不满意
液相中无机物出峰吗?
所谓的液相指液相色谱,用于将混合物中的各种化合物分离。液相色谱包括柱色谱(就是常说的柱层析)和高效液相色谱(HPLC)或超高效液相色谱(UPLC),一般来说我们常说的液相就是指(超)高效液相色谱。HPLC和UPLC的原理是一样的,只是两者之间分离化合物的能力方面(速度,灵敏度和分离度)有不同。因此,我以HPLC为例,来看看无机物会不会出峰。
HPLC包括五个系统:溶剂输送系统、进样系统、分离系统、检测系统和数据处理与记录系统。其中,溶剂输送系统用于给真个系统输送所需的溶剂(也就是我们所谓的液相),数据处理与记录系统就是与之相连的电脑从而处理所需要的出峰时间,峰高,峰面积等等最要的参数信息。进样系统、分离系统和检测系统则是整个HPLC的核心,我们将所需检测的样品用一定的溶剂溶解以后,通过进样系统将样品将样品送入分离系统,在这里样品经过一根色谱柱从而样品里的各类化合物开始分离,具体表现就是它们的保留时间不一样,也就是在谱图上的出峰时间会不同。分离开的化合物依次经过检测系统,这个系统可以将光、射线等信号转化为电信号,从而被数据系统接收,结果就是会在谱图上出峰。
HPLC中的检测系统最重要的组成部分就是检测器。检测器有很多个种类:包括紫外可见吸收检测器、光电二极管列阵检测器、荧光检测器、示差折光检测器、电化学显示器、化学发光检测器和放射性同位素检测器等等好多个种类的检测器。像紫外可见吸收检测器和光电二极管列阵检测器依赖于样品池与参比池会对光源有吸收不同来输出信号,而无机物和流动相一般不会吸收紫外或可见光,因此不会再检测器上有响应,也就不会出峰。而对于像示差折光检测器则依赖于样品池与参比池对光的折射率不同来输出电信号,而无机物对光的折射率和流动相是不同的,因此可以出峰。还有诸如放射性同位素检测器之类的检测器,只要含有放射性元素,无论无机物还是有机物都可以被检测到,因此都可以出峰。
综上,根据液相色谱中的检测器不同,无机物是否可以出峰需要分情况讨论。有些检测器(如紫外可见吸收检测器和光电二极管列阵检测器等)是检测不到无机物的,就不会出峰。而有些检测器(如示差折光检测器和放射性同位素检测器等)可以检测到无机物,可以出峰。
什么是对映体?高效液相色谱的手性拆分原理有哪些?
对映体:互为实物与镜像而不可重叠的一对异构体。如左旋乳酸与右旋乳酸是一对对映体。 对映体具有相同的物理性质(如熔点,沸点,溶解度,折射率,酸性,密度等),热力学性质(如自由能,焓、熵等)和化学性质。除非在手性环境(如手性试剂,手性溶剂)中才表现出差异。对映体对偏振光的作用不同,它们的比旋光度数值相同,但方向相反。等量的左旋体与右旋体的混合物构成外消旋体。 原理:从对映体中分离出单纯一个光学异构体的方法称拆解。最普通的拆解方法是将消旋体与光学活性相反的离子(称拆解剂)作用生成非对映体。被分析样品(气体或液体汽化后的蒸汽)在流速保持一定的惰性气体(成为载气或流动相)的带动下进入填充有固定相的色谱柱,在色谱柱中样品被分离成一个个的单一组分,并以一定的先后次序从色谱柱流出,进入检测器,转变成电信号,再经放大后,由记录器记录下来,在记录纸上得到一组曲线图(称为色谱图),根据色谱峰的峰高或峰面积就可以定量测定样品中各个组分的含量。