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测定蛋白质的方法

蛋白质是生命体中重要的组成部分,测定蛋白质含量是生物化学实验中常见的操作。本文将介绍测定蛋白质含量的三种主要方法。一、Lowry法Lowry法是一种经典的蛋白质测定方法,其原理基于蛋白质与Folin-Ciocalteu试剂发生酸碱反应,产生一种能与试剂反应的咖啡色物质。这种物质吸收波长位于750nm左右,可通过分光光度计进行测定。二、...

蛋白质是生命体中重要的组成部分,测定蛋白质含量是生物化学实验中常见的操作。本文将介绍测定蛋白质含量的三种主要方法。

一、Lowry法

Lowry法是一种经典的蛋白质测定方法,其原理基于蛋白质与Folin-Ciocalteu试剂发生酸碱反应,产生一种能与试剂反应的咖啡色物质。这种物质吸收波长位于750nm左右,可通过分光光度计进行测定。

二、Bradford法

Bradford法是一种比较敏感的蛋白质测定方法,其基本原理是使用甲醛标准曲线来溶解蛋白质并与Coomassie Blue G-250荧光染料结合。这种染料在蛋白质存在时会形成蓝紫色的化合物,其吸收波长为595nm。

三、Biuret法

Biuret法是一种粗略但方便快捷的蛋白质测定方法,基于蛋白质与Biuret试剂发生螯合反应。该方法的基本原理是蛋白质与Biuret试剂中的Cu2+离子形成紫色络合物,其吸收波长位于560nm左右。

蛋白质测定是生物化学实验中重要的一环,可通过Lowry法、Bradford法和Biuret法等多种方法进行。不同的方法有着各自独特的优缺点,需要根据实验需要和数据准确性的要求进行选择。

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