液相色谱满环进样出峰变小是什么原因?
峰面积变小的原因很多,从仪器本身来看,主要有以下2点!
1、检测器灯能量降低
2、柱效降低
3、进样环出现问题 首先你可以先确认是不是灯的能量减低,直接从其能量值就可以判断;然后你再看柱子理论塔板数是不是远低于新柱子 其他方面比如操作时,样品溶解不彻底,流速过低或者流动相配制过程中出现问题,或者检测波长设置不准确等等,这些一定要排除!
高效液相色谱法中肩峰如何处理?
也可以把流动相流速减小一点试试,有时也可以分开如果色谱柱柱效不好的话,试试换新柱子或用长柱子试试祝你成功
峰谷比是什么意思?
峰谷比是指按高峰用电和低谷用电分别计算电费的一种电价制度。
高峰用电,一般指用电单位较集中,供电紧张时的用电,如在白天,收费标准较高;低谷用电,一般指用电单位较少、供电较充足时的用电,如在夜间,收费标准较低。
实行峰谷电价有利于促使用电单位错开用电时间,充分利用设备和能源。有很多国家都实行峰谷电价,峰谷之间的价差有的达50%。我国有的地方也在试行中。
高效液相上峰高和峰面积多少可以忽略不计?
这个不好说,一个是看你的主成分。比如,有些原料药规定,杂质低于主成分的0.5%可以忽略不计。那么你主峰峰面积是1000,杂质峰峰面积低于5的色谱峰可以忽略不计。如果没有这方面规定的,可以按照峰高超过定量限的来计算。这个详细可以参考定量限的操作要求。就是说,当色谱峰的峰高是基线噪声的10倍时,这个色谱峰应该用于积分计算。
高相液相检测器的原理?
高效液相色谱法的原理是以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测。
高效液相色谱法有“四高一广”的特点:
①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。
②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。
③高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
④高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。
⑤应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。
扩展资料
高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点,但也有缺点,与气相色谱相比各有所长,相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。
在从进样到检测器之间,除了柱子以外的任何死空间(进样器、柱接头、连接管和检测池等)中,如果流动相的流型有变化,被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽,柱效率降低。高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。
空间排阻色谱法以凝胶(gel) 为固定相。它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径比分子筛要大得多,一般为数纳米到数百纳米。
溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离,而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。试样进入色谱柱后,随流动相在凝胶外部间隙以及孔穴旁流过。
在试样中一些太大的分子不能进入胶孔而受到排阻,因此就直接通过柱子,首先在色谱图上出现,一些很小的分子可以进入所有胶孔并渗透到颗粒中,这些组分在柱上的保留值最大,在色谱图上最后出现。